Том 19, № 1 (2016)

Обзор литературы посвящен применению методов секвенирования (метода исследования генома) при различных дерматологических заболеваниях. В статье описаны технологии, позволяющие установить нуклеотидную последовательность ДНК. Рассмотрен способ автоматизированного секвенирования по Сенгеру, а также секвенирование нового поколения (Next-Generation Sequencing). Приведены примеры генов и мутаций, которые были обнаружены при помощи секвенирования. В частности, описано клиническое значение мутаций в генах BRAF, NRAS, KIT, GNAQ, GNA11, каждая из которых играет решающую роль в патогенезе отдельных клинико-морфологических форм меланомы кожи. Показано, что выявление подтипов опухоли обеспечивает селективный подход в терапии меланомы кожи, что, в свою очередь, может быть применено при различных принципах лечения и дает возможность для прогнозирования развития химиорезистентности. Кроме того, представлены данные о других генах, играющих роль в патогенезе отдельных дерматологических заболеваний как опухолевого, так и неопухолевого генеза.

Порфирии относятся к группе редких метаболических заболеваний, связанных с нарушением ферментов биосинтеза гема, что приводит к накоплению порфиринов в тканях организма. Заболевание встречается редко и зачастую поздно диагностируется. Наиболее часто встречается поздняя порфирия кожи. Все больные данным дерматозом должны быть тщательно обследованы на вирусные гепатиты и на гемохроматоз. Приводим случай клинического наблюдения больного поздней порфирией кожи, ассоциированной с приемом алкоголя и вирусом гепатита С.

Гидраденит - заболевание многофакторной природы. Патогенез до настоящего времени недостаточно изучен, спорными являются взгляды на первичность поражения структурных элементов кожи, что и определяет актуальность проведения научных исследований в данном направлении. Представлены современные данные литературы о распространенности и этиологии заболевания, предложена классификация клинических проявлений и индекс Сарториус (Sartorius score) для градации тяжести заболевания, методы диагностики (бактериологические, иммуногистохимические и др.). Обсуждается роль генетических, коморбидных факторов, метаболических и гормональных нарушений, а также участия иммунной системы в развитии заболевания. Для терапии предложены местные и системные препараты, основной целью которой являются уменьшение бактериальной нагрузки, устранение фолликулярной окклюзии, нормализация иммунного ответа, коррекция гормонального статуса, улучшение заживления дефектов кожи, устранение болевого синдрома и улучшение качества жизни пациентов.

Аутоиммунная пузырчатка - группа аутоиммунных буллезных дерматозов, характеризующаяся внутриэпителиальным образованием пузырей и присутствием специфических IgG-аутоантител к антигенам межклеточной связывающей субстанции (МСС) многослойного плоского эпителия. Характерная иммуноморфологическая картина (фиксация IgG в МСС эпидермиса) позволяет диагностировать аутоиммунная пузырчатка. Однако, в ряде случаев, в ходе использования данного метода диагностики визуализация специфических признаков затруднительна в силу слабовыраженной и/или неравномерной специфической иммуногистохимической реакции, что не позволяет с абсолютной точностью поставить диагноз. В работе проведен анализ 805 изображений иммунофлюоресцентной картины диагностики при аутоиммунной пузырчатке у 54 больных. Предлагается алгоритм компьютерной обработки изображений образцов ткани кожи, заключающийся в повышении качества и выделении конкретных межклеточных структур, характерных для оценки иммуноморфологической картины пузырчатки. Алгоритм состоит из выравнивания освещенности, медианной фильтрации, обработки фильтром Гаусса, детектирования хребтовых структур при помощи матрицы Гессе, бинаризации изображения, выделения, на полученной карте хребтовых структур, связных компонент и удаления компонент с малым радиусом. Это позволяет в сомнительных случаях дифференцировать и диагностировать аутоиммунную пузырчатку. Кроме того, четкая визуализация характера (гранулярное или линейное) фиксации иммуноглобулина класса G в межклеточных пространствах эпидермиса повышает точность прогнозирования дальнейшего течения болезни (благоприятное либо торпидное), обеспечивая своевременное адекватное ведение пациента с назначением патогенетически обоснованных схем лечения. Данная работа подчеркивает важность внедрения современных компьютерных методов обработки медицинских изображений, позволяющих существенно совершенствовать методы диагностики заболеваний человека, включая аутоиммунных буллезных дерматозов.

В зависимости от клинических проявлений пациентам с герпетической инфекцией назначали дифференцированную терапию с применением препаратов валвир и панавир. Результаты проведенного исследования показали, что целесообразно лечение герпетической инфекции проводить по дифференцированным схемам терапии в зависимости от варианта клинического течения.

Интерес к методам анкетного опроса в медицине обусловлен стремлением к поиску комплексных подходов оценки состояния больного, позволяющих получить исчерпывающее представление об отношении пациентов к назначаемой терапии. Цель - изучить доверие пациентов с кожной патологией к разным методам и средствам терапии в зависимости от давности заболевания. В исследовании участвовали больные с разными сроками течения дерматозов (менее 1 мес; от 2 до 6 мес, от 6 до 24 мес и более 24 мес) разделенные на группы по 50 человек в каждой, а также 65 здоровых людей. Все респонденты добровольно заполняли анкету включающую вопросы о доверии к терапевтическим средствам, не являющимся лекарственными препаратами, а также о согласии использования предложенных традиционных и не традиционных методов и средств лечения. Методом анкетного опроса выявлено, что если дерматоз беспокоит человека более 1-го месяца, то 100% пациентов высказывают согласие на использование любых методов терапии. Положительное отношение к альтернативным методам лечения возрастает с течением времени заболевания, где ранговый коэффициент Спирмена показывает прямую зависимость. Критической точкой течения дерматозов, заставляющей пациентов искать любые альтернативные методы лечения, является промежуток времени от 2 до 6 мес. Уровень доверия пациентов к лекарственным препаратам остается постоянно высоким и не зависит от сроков заболевания. Метод анкетного опроса является простым и информативным, позволяет оценить мнение большинства пациентов о проводимой терапии и приемлем для разработки алгоритма лечения дерматологических больных.

Проведено изучение действия инъекционного препарата для мезотерапии (Meso-Wharton Р199™) на культуры дермалънъх фибробластов, моделирующих состояние клеток в (зрелой) стареющей коже. Материал и методы. В работе использовали культуру фибробластов на 4-м пассаже (Р4), которая соответствовала по своим характеристикам фибробластам молодой кожи (контроль) и культуру фибробластов после 18-го пассажа (Р18), в которой все признаки старения дермальнъгх фибробластов (преобладание крупнъгх плащевидных и парусовиднъгх клеток, снижение темпов клеточного деления) бъгли хорошо заметны. Биоактивность оценивали по морфологии клеток, эпителио-мезенхимной пластичности и экспрессии характерных для фибробластов маркеров: цитокератина 19, эластина, а-гладкомышечного актина (aSMA), PCNA (маркера пролиферации), коллагенов типов I, III, IV и фибронектина. Результаты. При культивировании фибробластов Р18 с исследуемым инъекционным препаратом происходит формирование сфероидов, по срокам сопоставимое с формированием сфероидов из молодых фибробластов Р4. Из культуры фибробластов Р18, культивированных без препарата не происходит формирования полноценного сфероида, а наблюдается агрегация клеток и их постепенная гибель с некротической массой внутри агрегата. Присутствие в ростовой среде препарата стимулирует «омоложение» клеток и последующее восстановление мезенхимо-эпителиальной пластичности культивированных фибробластов за счет восстановленной способности синтезировать в достаточном для установления межклеточных контактов количестве компонентов внеклеточного матрикса (фибронектина и коллагенов), что влияет на способность формировать сфероиды. Культивирование образовавшихся сфероидов с препаратом стимулирует экспрессию эластина, коллагена IV типа, фибронектина, белка внеклеточного матрикса, поддерживающего упругость кожи, а поверхностные клетки активно экспрессируют цитокератин 19. Результаты исследования убедительно демонстрируют эффективность применения мезотерапевтического препарата для омоложения кожи.