CD45 IN CUTANEOUS MELANOMA CELLS AS A MANIFESTATION OF TUMOR ATYPIA

全文:

Меланома кожи характеризуется высокой способностью к быстрому метастазированию в любые органы и ткани, а также возможностью имитировать другие типы доброкачественных и злокачественных неоплазий. Кроме того, для метастатической меланомы характерно наличие зон выраженной некро-тизации в опухолевом очаге [1]. Таким образом, при дифференциальной диагностике меланомы кожи достаточно часто возникают затруднения. Идентификация нескольких иммуногистохимических маркеров в значительной степени позволила оптимизировать дифференциальную диагностику меланомы кожи. В первую очередь для дифференциальной диагностики с немеланоцитарными новообразованиями в рутинной практике используют S-100, который обнаруживают в 97% меланом, а также Melan-A и HMB-45, выявляемые соответственно в 80 и 71% случаев [2]. Цитокератины AE1/AE3 и тироглобулины применяют для идентификации некротических опухолей [3]. Более того, показано, что экспрессия цитокератинов при метастатической меланоме кожи указывает на неблагоприятный прогноз и поэтому может быть использована как прогностический фактор [4]. Вместе с тем в литературе описаны случаи полного отсутствия S-100, HMB-45, Melan-A в первичной ме ланоме кожи [5]. Имеются также данные о том, что метастатическая меланома, происходящая из множественных первичных очагов, а также множественная рецидивирующая меланома теряют способность экспрессировать антиген меланомы Melan-A [6]. Говоря о некротической меланоме, следует отметить, что имеются данные о возможности полного отсутствия экспрессии маркеров меланомы в тех областях, где имелся коагуляционный некроз ткани [7]. Помимо этого, в литературе описаны случаи выявления в опухолевых клетках положительной реакции на антигены, не характерные для меланомы кожи, в частности CD45 [7]. CD45 является маркером гемопоэти-ческих опухолей и в клетках меланомы кожи обычно не выявляется [8]. Цель исследования анализ образцов меланомы кожи на наличие экспрессии CD45 клетками опухоли в связи с широким использованием CD45 как маркера гемопоэтических клеток. Материалы и методы Проведено исследование биоптатов кожи 96 больных (40 мужчин, средний возраст 52,16 ± 4,02 года, и 56 женщин, средний возраст 49,12 ± 2,52 года, меланомой кожи. У 21 (22,6%) больного меланома была локализована в об Сведения об авторах: Аксененко Мария Борисовна ассистент (aksenenko_mariya@mail.ru); Шестакова Людмила Анатольевна кандидат мед. наук, доцент (patholog-lan@yandex.ru); Рукша Татьяна Геннадьевна доктор мед. наук (tatyana_ruksha@mail.ru). 6 № 4, 2013 Рис. 1. Узел пигментной меланомы, поля некрозов опухолевых клеток, активно экспрессирующих CD45. Ув. 400. ласти головы и шеи, у 20 (20,6%) верхних конечностей, у 28 (28,8%) туловища, у 27 (25%) нижних конечносте. В 1-ю группу (n = 25) вошли пациенты с поверхностно-рас-пространяющейся меланомой, во 2-ю группу (n = 24) с узловой меланомой, в 3-ю группу (n = 24) с меланомой лентиго, в 4-ю группу (n = 23) с акрально-лентигинозной меланомой. Все пациенты находились на лечении в Красноярском краевом онкологическом диспансере. Образцы кожи фиксировали в 10% нейтральном забуфе-ренном формалине. Срезы толщиной до 5 мкм подвергали иммуногистохимическому исследованию по стандартной методике с моноклональными антителами к CD45 ("Сорбент", Россия). Для визуализации использовали систему детекции Novo Link Polymer Detection System ("Leica", Великобритания). В дальнейшем срезы докрашивали гематоксилином. Подсчет положительно окрашенных клеток производили при увеличении 400 с помощью микроскопа Olympus BX-41. Провели качественную оценку наличия экспрессии CD45 в гистологических препаратах. Кроме того, устанавливали взаимосвязь между экспрессией CD45 и прогностическими факторами заболевания (возраст, пол, локализация новообразования, гистологический подтип опухоли, толщина опухоли по Бреслоу, уровень инвазии по Кларку, выраженность инфильтрации опухоли лимфоцитами, наличие изъязвления опухоли). Статистический анализ полученных данных провели с помощью программы Statistica 6,0. Результаты исследования проверили на нормальность распределения с помощью критерия Колмогорова-Смирнова. В случае нормального распределения использовали t-критерий Стьюдента. Для оценки качественных признаков применяли точный односторонний критерий Фишера, для оценки факта наличия корреляционных связей, их силы и направленности ко -эффициент корреляции Пирсона. Результаты и обсуждение Экспрессию CD45 в клетках меланомы определили у 17,5% больных. При оценке клинико-морфологических параметров получили следующие результаты. Распределение пациентов по полу было равномерным: в 52,9 ± 2,13% случаев экспрессия CD45 в клетках меланомы определялась у женщин и в 47,1 ± 3,7% случаев у мужчин в возрасте от 44 лет до 81 года. Преимущественно данную группу составили пациенты с IV и V уровнями инвазии по Кларку (53,2 ± 5,4 и 35,2 ± 1,6 % соответственно), со средней толщиной опухоли по Бреслоу 3,7 ± 1,09 мм. Распределение пациентов по клинико-морфологической форме заболевания было следующим: поверх-ностно-распространяющаяся меланома оказалась у 17,6% больных, узловая меланома у 35,2%, лентиРис. 2. Экспрессия CD45 опухолевыми клетками меланомы. Ув. 600. го-меланома у 17,6%, акрально-лентигинозная меланома у 29,4%. Новообразования локализовались в области нижних конечностей у 29,4% больных, верхних конечностей у 35,2%, головы и шеи у 23,5%, туловища у 11,7%. Не выявлено корреляционной взаимосвязи ни с одним из изучаемых прогностических признаков заболевания, таких как толщина опухоли по Бреслоу (r = 0,32; а = 0,05), инвазия опухоли по Кларку (r = 0,24; а = 0,02), локализация новообразования (r = 0,36; а = 0,02), морфологическая форма заболевания (r = 0,44; а = 0,01), пол (r = 0,18; а = 0,02), возраст (r =0,25; а = 0,02), выраженность лимфоцитарного инфильтрата (r = 0,38; а = 0,05). Установлено, что наличие CD45-положительных опухолевых клеток наблюдается преимущественно в зонах некротизации опухоли (рис. 1, 2) у больных с IV и V уровнями инвазии по Кларку независимо от клинико-морфологической формы заболевания, а также пола, возраста, локализации опухоли, выраженности лимфоцитарного инфильтрата и наличия изъязвления опухоли. В литературе [9] указывается, что при массивной некротизации злокачественные опухоли (в частности, меланома) могут приобретать способность экспрессировать CD45. По данным литературы, некроз опухоли может рассматриваться в качестве морфологического маркера тканевой гипоксии, который коррелирует с увеличением толщины опухоли, а также со степенью инвазии узловой меланомы кожи. Кроме того, не исключена возможность активации в опухолевых клетках меланомы кожи при некрозе других внутриклеточных сигнальных путей посредством аутокринных механизмов. Таким образом, появление экспрессии CD45 в клетках меланомы кожи может быть проявлением антигенного атипизма, способствующего дальнейшему прогрессированию опухоли, а также быть косвенным признаком нестабильности генома в клетках новообразования. Данные о возможной экспрессии CD45 в клетках меланомы кожи можно использовать при проведении дифференциальной диагностики меланомы кожи со злокачественными новообразованиями системы кроветворения.

作者简介

M. Aksenenko

V.F.Voino-Yasenetsky Krasnoyarsk State Medical University

Email: aksenenko_mariya@mail.ru

L. Shestakova

V.F.Voino-Yasenetsky Krasnoyarsk State Medical University

Email: patholog-lan@yandex.ru

T. Ruksha

V.F.Voino-Yasenetsky Krasnoyarsk State Medical University

Email: tatyana_ruksha@mail.ru

参考

补充文件