Характеристика Т-лимфоцитов различных рецепторных фенотипов у больных псориазом в процессе лечения

Полный текст

Псориаз – хроническое рецидивирующее аутовоспалительное заболевание кожи, которое встречается примерно у 2% населения [1]. Высокая частота заболеваемости псориазом во всем мире среди лиц трудоспособного возраста обусловливает повышенный интерес исследователей к данной патологии. Тяжелое течение дерматоза (псориатический артрит, псориатическая эритродермия, пустулезный псориаз) нередко лишает возможности заниматься профессиональной деятельностью, приводит к длительной нетрудоспособности, а порой и к инвалидизации, что отрицательным образом сказывается на качестве жизни пациента. Помимо поражения суставов заболевание имеет ряд других коморбидностей (сердечно-сосудистые нарушения, метаболический синдром, болезнь Крона и др.) [2, 3].

В последние десятилетия удалось достичь значительных успехов в понимании сложных механизмов, провоцирующих запуск и поддерживающих течение псориаза: в частности, были открыты субпопуляции Т-клеток, играющие различную роль в развитии воспаления кожного процесса. Отдельные популяции выступают в качестве инициирующих агентов, другие – в качестве регулируемых клеток-эффекторов, усиливающих воспаление и, возможно, опосредующих выраженность клинических проявлений [4, 5].

Актуальной задачей современной медицины является изучение молекулярных механизмов запуска заболевания, обнаружение новых терапевтических мишеней, определение диагностических и прогностических маркеров течения псориаза.

Цель исследования – анализ характера иммунного реагирования на различные виды терапии псориаза на основании результатов изучения основных субпопуляций Т-лимфоцитов, их уровня, рецепторного фенотипа и клинической значимости, а также изменения содержания цитокинов в сыворотке крови больных.

Материал и методы

В исследовании приняли участие 68 больных (30 мужчин и 38 женщин) в возрасте от 18 до 60 лет с верифицированным диагнозом псориаза и наличием прогрессирующей или стационарной стадии. Вульгарной формой псориаза страдали 52, экссудативной – 16 пациентов. У подавляющего большинства испытуемых патологический процесс носил распространенный характер поражения. Средний возраст больных составил 41,2 ± 16,3 года, средний возраст начала заболевания – 34,1 ± 10,5 года.

В качестве абсолютного контроля была сформирована группа здоровых добровольцев в количестве 22 человек.

Пациенты были проинформированы о целях и задачах исследования, после чего подписывали бланк-форму информированного согласия на участие.

Критериями включения были пациенты с площадью поражения кожного покрова более 50%, не принимающие на момент взятия крови системную иммуносупрессивную терапию в течение 2 мес. К исследованию не допускались больные с наличием тяжелой сопутствующей соматической патологии в стадии декомпенсации; имеющие онкологические заболевания; имеющие инфекционные заболевания (сифилис, ВИЧ, гепатит В и С); с диагнозом туберкулеза; с диагнозом эпилепсии; пациенты, страдающие алкоголизмом, наркоманией и любыми психическими расстройствами; в периоде беременности или лактации. Критериями исключения являлись желание пациента прекратить участие в исследовании или несоблюдение им режима, назначенной схемы обследования и лечения. Всем участникам исследования проводилась стандартная программа клинико-лабораторного контроля для данного заболевания, определяли индекс распространенности и тяжести псориаза (PASI, Psoriasis Area and Severity Index), дерматологический индекс качества жизни (ДИКЖ).

В зависимости от варианта лечения больные были распределены на две группы: в первой группе (32 больных) проводили селективную фототерапию, во второй (36 больных) – лечение метотрексатом совместно с селективной фототерапией. До лечения, через 3 и 6 мес от его начала анализировали следующие параметры: содержание в периферической крови субпопуляций Т-лимфоцитов (CD3⁺, CD4⁺, CD8⁺) и Treg (регуляторных Т-лимфоцитов) с помощью метода проточной цитометрии с использованием моноклональных антител, концентрации интерлейкинов (IL-1β, IL-2, IL-6), фактора некроза опухоли альфа (tumor necrosis factor, TNFα), интерферона гамма (IFNγ) в сыворотке крови методом твердофазного иммуноферментного анализа. Статистическую значимость различий результатов исследования оценивали с помощью программ Microsoft Excel 13, SPSS Statistics 17.0, Mann–Whitney U Test Calculator.

Результаты и обсуждение

Оценка тяжести и распространенности по индексу PASI до начала терапии свидетельствовала, что у всех больных, включенных в исследование, был псориаз средней и тяжелой степени. При этом значимых межгрупповых различий не выявлено. Определение значения ДИКЖ до начала лечения значимых межгрупповых различий также не показало, однако качество жизни у данных больных было существенно снижено. Показатели PASI и ДИКЖ в группах до начала лечения представлены в табл. 1.

 

Таблица 1

Показатели PASI и ДИКЖ в группах больных до начала лечения (M ± m)

Показатель	1-я группа, n = 32	2-я группа, n = 36
PASI	19,4 ± 2,4	25,7 ± 3,7
ДИКЖ	14,0 ± 3,3	18,5 ± 2,4

Примечание. PASI (от Psoriasis Area and Severity Index) – индекс распространенности и тяжести псориаза; ДИКЖ – дерматологический индекс качества жизни.

 

Изучение иммунного статуса больных псориазом до лечения по сравнению с группой контроля выявило ряд изменений: повышение абсолютного и относительного содержания CD8-цитотоксических Т-лимфоцитов (табл. 2).

 

Таблица 2

Иммунологические показатели больных псориазом до лечения (M ± m)

Показатель	Здоровые доноры, n = 22	Больные псориазом, n = 68
CD3+, % Т-лимфоциты	74,2 ± 8,5	78,7 ± 6,2
CD3+, абс., ∙103/мкл	1,21 ± 0,22	1,34 ± 0,16
CD4+, % Т-лимфоциты	47,2 ± 2,9	45,6 ± 6,2
CD4+, абс., ∙103/мкл	0,78 ± 0,06	0,90 ± 0,11
CD8+, % цитотоксические Т-лимфоциты	24,9 ± 3,2	34,0 ± 2,8*
CD8+, абс., ∙103/мкл	0,40 ± 0,05	0,50 ± 0,05
Treg, %	6,79 ± 1,15	3,80 ± 0,46*
Treg, абс., ∙103/мкл	0,111 ± 0,019	0,062 ± 0,008*

Примечание. Здесь и в табл. 3, 4: * – p < 0,05 – различия статистически значимы при сравнении с группой здоровых доноров (контрольной группой).

 

Изучение уровня цитокинов до лечения у больных псориазом по сравнению с группой контроля выявило повышение концентрации IL-1β, IL-2, IL-6, TNFα и снижение показателей IFNγ (табл. 3).

 

Таблица 3

Показатели цитокинов больных псориазом (M ± m)

Показатель	Здоровые доноры, n = 22	Больные псориазом, n = 68
IL-1β, пг/мл	5,7 ± 1,2	19,3 ± 2,0*
IL-2, пг/мл	16,8 ± 3,4	41,4 ± 6,1*
IL-6, пг/мл	19,5 ± 4,1	37,4 ± 7,5*
TNFα, пг/мл	6,8 ± 1,9	21,3 ± 2,7*
IFNγ, пг/мл	56,8 ± 7,3	29,7 ± 4,4*

 

Анализ динамики показателя PASI в процессе лечения в группах больных псориазом показал, что если до начала терапии различий не отмечено, то спустя 6, 12 и 24 нед более выраженное уменьшение данного параметра было у больных второй группы (рис. 1). Динамика показателя ДИКЖ также показала более выраженное снижение именно во второй группе (рис. 2).

 

Рис. 1. Динамика показателя PASI в процессе лечения больных псориазом.

 

Рис. 2. Динамика показателя ДИКЖ в процессе лечения больных псориазом.

 

В ходе проводимой терапии через 24 нед после начала лечения наблюдалась следующая динамика иммунологических показателей (табл. 4):

 

Таблица 4

Субпопуляции иммунокомпетентных клеток у больных псориазом через 24 нед после от начала лечения (M ± m)

Показатель	Группа контроля, n = 22	1-я группа, n = 32	2-я группа, n = 36
Treg, %	6,79 ± 1,15	3,42 ± 0,28*	5,06 ± 1,14
CD3+, %	74,2 ± 8,5	75,2 ± 4,4	76,4 ± 4,1
CD4+, %	47,2 ± 2,9	43,1 ± 4,4	42,7 ± 4,8
CD8+, %	24,9 ± 3,2	32,5 ± 1,6*	25,2 ± 4,7

 

• в 1-й группе больных относительное содержание регуляторных Т-лимфоцитов оставалось сниженным, в то время как у пациентов 2-й группы значения данного показателя повысились и значимо не отличались от контрольных величин;
• содержание CD3-лимфоцитов в периферической крови существенно не различалось в 1-й, 2-й группах и группе контроля;
• уровень CD4-лимфоцитов (Т-хелперов) во всех группах больных псориазом был несколько ниже, чем в контрольной группе, но значимых различий при этом не выявлено;
• относительное количество CD8-клеток (цитотоксических Т-лимфоцитов) в 1-й группе оставалось статистически значимо повышенным, в то время как у больных 2-й группы после проведенного лечения оно снизилось и значимо не отличалось от контроля.

 

Таблица 5

Взаимосвязь между иммунологическими показателями и клиническими проявлениями тяжести псориаза (коэффициенты корреляции Спирмена, R*)

Параметр	PASI	ДИКЖ
Treg, %	-0,35	-0,38
CD3+, %	-0,30	–
CD4+, % Т-хелперы	-0,32	-0,35
CD8+, % цитотоксические Т-лимфоциты	0,42	0,35
IL-1β, пг/мл	0,45	–
IL-2, пг/мл	0,52	0,44
IL-6, пг/мл	0,37	–
TNFα, пг/мл	0,57	0,32
IFNγ	-0,46	–

Примечание: * p < 0,05 – представлены только значимые коэффициенты корреляции.

 

В табл. 5 представлены коэффициенты корреляции Спирмена умеренной силы между уровнем активности заболевания по показателю PASI и следующими иммунологическими параметрами: относительным количеством T-регуляторных лимфоцитов (R = -0,38), показателями CD3⁺ в периферической крови (R = -0,30), CD4⁺ (Т-хелперов) (R = -0,32), CD8⁺ цитотоксических Т-лимфоцитов (R = 0,42). Также выявлено наличие ряда корреляций между значениями активности псориаза (PASI) и концентрациями всех изученных цитокинов у обследованных больных: IL-1β (R = -0,45), IL-2 (R = 0,52), IL-6 (R = 0,37), TNFα (R = 0,57), а также IFNγ (R = -0,46).

Также расчеты показали наличие ряда значимых корреляционных связей между показателя качества жизни (ДИКЖ) и иммунологическими характеристиками: содержанием Treg клеток (R = -0,38), показателями CD3-лимфоцитов (R = -0,30), содержанием в периферической крови CD4 Т-хелперов (R = -0,35), относительным содержанием CD8-цитотоксических Т-лимфоцитов (R = 0,35).

Обнаружено наличие значимых отрицательных корреляций между показателями качества жизни больных псориазом и содержанием IL-2 (R = 0,44), а также TNFα (R = -0,32).

Результаты проведенного анализа свидетельствуют о наличии ряда значимых корреляционных связей умеренной силы между показателями активности процесса у больных псориазом, с одной стороны, и иммунологическими характеристиками (в частности, показателями содержания различных субпопуляций Т-лимфоцитов в периферической крови) больных псориазом – с другой.

Таким образом, выявленная динамика показателей иммунного статуса в процессе лечения больных псориазом свидетельствует о тенденции к восстановлению нарушенных функций иммунной системы у пациентов, которая проявляется через 3–6 мес от начала лечения нормализацией баланса клеточных субпопуляций лимфоцитов, в частности Т-лимфоцитов. При этом наиболее эффективным оказалось комбинированное применение селективной фототерапии и метотрексата.

Об авторах

Н. Г. Кочергин

ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет)

Email: paramonov_aleksey@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-7136-4053

Кафедра кожных и венерических болезней им. В.А. Рахманова

Россия, 119991, г. Москва

А. А. Парамонов

ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет)

Автор, ответственный за переписку.
Email: paramonov_aleksey@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-0441-314X

соискатель кафедры кожных и венерических болезней им. В.А. Рахманова

Россия, 119991, г. Москва

Л. Н. Каюмова

ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет)

Email: paramonov_aleksey@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-0301-737X

Кафедра кожных и венерических болезней им. В.А. Рахманова

Россия, 119991, г. Москва

Список литературы

Дополнительные файлы